（2）血琼脂平板 双环溶血（内环β，外环a溶血）
（3）牛奶培养基“爆裂发酵”→被此菌感染，肚子鼓胀，像气球样
·牛奶培养基“爆裂发酵”
1本菌最为突出的生化特性，也有例外的菌株
2什么是“爆裂发酵”？
产气荚膜梭菌于接种牛乳培养基中培养 8~10h 后，发酵牛乳中的乳糖，使牛乳酸凝，同时产生大量气体使凝块破裂成 多孔海绵状，严重时被冲成数段，甚至冲出管外。
毒素与菌型
1以菌体抗原进行血清型分类意义不大，且菌体抗原与以毒素分型之间没有明显关系。
2依据主要致死性毒素与其抗毒素的中和试验可将此菌分为 A、b、c、d 和 E 5 个型，A 型和 c、d 型的某些菌株可产生肠毒素。
3 毒素以小写希腊字母表示，有 15 种，均为蛋白质，其中a、β、e和 l 是主要致死毒素。
2.致病性
2.1 致病物质（会出现广泛出血，死的很快）
1a毒素：以 A 型菌产量最大，引起血管通透性升高，伴大量溶血，组织坏死，肝心功能受损，在气性坏疽的形成起主要作用。
2β、e和 l 引起组织损伤坏死和血管通透性升高
3肠毒素
2.2 所致疾病
1气性坏疽：主要由 A 型产气荚膜梭菌引起，致病条件与破
伤风相同。潜伏期短，发展迅速，病情险恶，
死亡率高，以组织坏死，气肿和全身中毒为特征
1组织坏死，血管内皮损伤，通透性
上升，导致出血、水肿、局部坏死
2分解糖类产气，压迫软组
织、血管，加重组织坏死
3分解组织，病情迅速扩散，引起全身中毒症状
2食物中毒：食入大量细菌污染的食物（多为肉类）
3肠毒血症（软肾病）
2.3 各型产气荚膜梭菌所致病（需掌握仔猪白、黄、红、黑痢病原，螺旋体那章归纳）
1A 型菌：
主要是引起人气性坏疽和食物中毒的病原，也引起动物的气性坏疽，还可引起牛、羔羊、仔猪、家兔等的肠毒血症
2b 型菌：
主要引起羔羊痢疾，还可引起犊牛、羊的肠毒血症或坏死性肠炎
3c 型菌：
主要引起绵羊猝狙的病原，也能引起犊牛、羔羊、绵羊、仔猪的肠毒血症和坏死性肠炎以及人的坏死性肠炎
4d 型菌：
引起羊、牛以及灰鼠的肠毒血症
5E 型菌：
可致犊牛、羔羊肠毒血症，但很少发生
3.微生物学诊断
1本菌 A 型所致气性坏疽及人食物中毒微生物学诊断，主要依靠细菌分离鉴定。
2其余各型所致的各种疾病，均系细菌在肠道内产生毒素所致，细菌本身不一定侵入机体；同时正常入畜肠道中常有此菌存在，在非本菌致死的动物也很容易于死后被此菌浸染。因此，从病料中检出该菌，并不能说明它就是病原。
所以细菌学检查只有当分离到毒力强大的此菌时，才具有一定的参考意义
鉴定本菌的要点为：
1革兰阳性粗杆菌、不运动
2厌氧生长、菌落整齐、生长快
3有双层溶血环
4引起牛奶爆裂发酵
5胸肌注射鸽越夜死亡，胸肌涂片可见有荚膜的菌体
肠内容物毒素检查
其方法为取回肠内容物，加适量灭菌生理盐水稀释，经离心沉淀后取上清液分成两份，一份不加热，一份加热，分别静脉注射家兔或小鼠。如有毒素存在，不加热组动物常于数分钟至数十小时内死亡，而加热组动物不死亡。
为确定致死动物毒素类别及其细胞型别，须进一步做毒素中和保护试验。
其方法为将前述上清液分为 6 份，分别加入适量此菌各型抗毒素及生理盐水（对照）混合均匀后再 37c下作用 40min，然后各静脉注射小鼠或家兔一组，观察 24h记录各组动物死亡及存活情况，并按表 14-6 判定菌型。
4.免疫防治
预防羔羊痢疾、猝狙、肠毒血症以及仔猪肠毒血症等，可用三联菌苗或五联菌苗，参见腐败梭菌病免疫防治。
肉毒梭菌
（1）本菌是一种腐生性细菌，广泛分布于土壤，海洋和湖泊沉积物、哺乳动物、鸟类和鱼的肠道，饲料以及食品中。
（2）对人畜的致病性：所有温血动物和冷血动物对肉毒素均有感受性，在家畜中以马最为易感，猪最迟钝。自然情况下:
1A、b 型毒素引起马、牛、水貂等动物饲料中毒和鸡软颈病
2c 型毒素为各种禽类、马、牛、羊以及水貂肉毒中毒症的主要病因
3d 型毒素是南非和澳大利亚牛、绵羊肉毒中毒的病因
4A、b、E 及 F 型毒素引起人的食物中毒
5G 型（阿根廷梭菌）毒素的致病性还不十分清楚
6F 型肉毒梭菌可能与幼儿腹泻有关
破伤风梭菌
本菌又名破伤风杆菌，是引起人畜破伤风 病原。本病以骨骼肌发生强直性痉挛症状为特征，故又称为强直症，此菌也因此称为强直梭菌。
1.主要生物学特性
1.1 形态及染色特性
1本菌为两端钝圆、细长、正直或略弯的杆菌，长度变化很大。多单在，有时成双，偶有短链，在湿润琼脂表面上，可形成较长的丝状。
2无荚膜，多具周鞭毛而能运动
3在动物体内外均能形成圆形芽孢，位于菌体一端，偶尔有卵圆形或次端生者，横径显着大于菌体，而使芽孢体呈鼓槌状。
4革兰阳性，培养 24h 以后常常出现阴性染色者。
1.2 培养特性
1此菌为严格厌氧菌，接触氧后很快死亡
2最适生长温度为 37c，在 37c和 45c生长微弱或不生长
3最适 ph 7.0~7.5
4营养要求不高，在普通培养基中即能生长。在血琼眼平板上生长，可形成直径 4~6mm 的菌落，常常伴有狭窄的溶血环。
5生长表现
（1）在一般琼脂表面不易获得单个菌落，尤其是在培养基湿润的情况下，扩散或薄膜状覆盖整个平板表面，边缘呈卷曲细丝状，用高浓度琼脂可抑制其扩散生长。
（2）在厌氧肉肝汤、庖肉培养基和 pYG 肉汤中，轻微浑浊生长，有细颗粒状或黏稠状沉淀，肉渣部分消化且微变黑，产气并散发特殊臭味。
2.致病性
2.1 致病条件
1造成此病发生的创伤必须具有厌氧环境。
2当创伤内发生组织坏死时，坏死组织能吸引游离氧而形成良好的厌氧环境。
3其他需氧菌的混合感染，也有利于厌氧形成。
2.2 致病因子（被钉子钉到→打抗毒素）
1此菌产生两种毒素
（1）破伤风痉挛毒素：毒力非常强，是蛋白质，由两个亚单位组成，大亚单位结合细胞受体，小亚单位发挥毒性作用，可引起神经兴奋性异常增高和骨骼肌痉挛。
（2）破伤风溶血素： 不耐热，对氧敏感，可溶解马及家兔红细胞，其作用可被相应抗体血清中和，与破伤风梭菌的致病性无关。
2破伤风梭菌毒素具有良好的免疫原性，用它制成类毒素，能产生坚强的免疫，非常有效地预防本病的发生。
3在自然情况下，本菌可感染很多动物
马属动物的易感性最高
其次是牛、羊、猪、犬、猫间或发病
禽类和冷血动物不敏感
4幼龄动物比成年动物更敏感。实验动物中家兔小鼠、大鼠、豚鼠和猴对破伤风痉挛毒素易感。
5人易感
3.微生物学诊断
1破伤风临床症状特征，一般不需微生物学诊断。
2如有特殊需要，可采取进行毒素检查，其方法为小鼠尾根皮下注射 0.5~1.0ml 观察 24h，是否出现尾部和腿强直或全身肌肉痉挛等症状，且不久死亡。
3进一步还可用破伤风抗毒素血清，进行毒素保护试验。
4.免疫防治
1主动免疫预防可用明矾沉淀破伤风类毒素，注射后 1 个月产生免疫力，免疫期 1 年。若第 2 年再注射 1 次，则免疫力可持续 4 年。
2破伤风抗毒素血清可用于紧急预防（例如发生严重创伤时或进行大手术之前）及破伤风治疗，效果不错。此被动免疫力产生迅速，但仅能维持 14~21d。